液流系統(tǒng)
液流問題在流式細(xì)胞術(shù)發(fā)展史上占有很重要的地位。從本世紀(jì)30年代到50年代,流式細(xì)胞術(shù)發(fā)展遲緩的一個(gè)重要原因就是細(xì)胞懸液過毛細(xì)管或小孔時(shí)的阻塞問題得不到解決,直到引入層流鞘液的方法后,不但使液流更加穩(wěn)定,約束細(xì)胞在液柱中間;而且較徹底地解決了阻塞問題。
穩(wěn)流與雷諾數(shù)
常識告訴我們,當(dāng)液體流動(dòng)時(shí),有時(shí)是穩(wěn)定的流動(dòng),有時(shí)會產(chǎn)生漩渦。流體力學(xué)稱前者為穩(wěn)流或片流,后者為端流,但區(qū)別二者的根據(jù)是什么呢?
上個(gè)世紀(jì),雷諾發(fā)現(xiàn)了一個(gè)以他的名字命名的數(shù)—雷諾數(shù),其定義如下:在一個(gè)直徑為d的管子內(nèi),流動(dòng)液體的平均速度是V,如果液體的密度為P,粘滯系數(shù)為n,則雷諾數(shù)R。
當(dāng)R=2300時(shí)就是前面我們討論的穩(wěn)流與端流的分界點(diǎn),當(dāng)R<2300時(shí)是穩(wěn)流,當(dāng)R>2300時(shí)是端流。顯然,在流式細(xì)胞計(jì)中我們希望都保持穩(wěn)流。如果噴孔直徑是100um,水的密度為1g/cm3,水在20℃時(shí)的粘滯系數(shù)是0.010泊,可計(jì)算出B=23米/秒。這是流式細(xì)胞計(jì)噴孔噴射速度的極限,其實(shí)當(dāng)噴射速度過快時(shí)還有另一問題,比如其中a是速度較慢時(shí)的正常狀態(tài),液體與噴孔有浸潤現(xiàn)象,這樣的液柱是穩(wěn)定的,當(dāng)速度過大時(shí),從噴孔截面就形成液柱,這樣的液柱在空間的位置是不穩(wěn)定。盡管它也是穩(wěn)流,雷諾數(shù)尚不到2300.這樣的分界點(diǎn)的液流速度與液體及噴孔材料濕潤情況有關(guān),考慮到各種因素,常限制噴射速度在10米/秒以下。
噴嘴
實(shí)際噴嘴結(jié)構(gòu),中間是含有細(xì)胞懸液的樣品,樣品外面包圍著鞘液從噴嘴中噴出,由于噴射速度較高磨損嚴(yán)重,故噴孔大多用耐磨的鐘表寶石制成。測量區(qū)在噴孔外面很近處的空氣中。
這樣的設(shè)計(jì)還有一個(gè)有點(diǎn),就是液流的聚焦作用。如果流體從一個(gè)截面為A1的粗管流入一個(gè)截面為A2的細(xì)管,按流體力學(xué)的Bernoulli定律:A1V1=A2V2式中V1,V2分別是流體在粗管中的平均流動(dòng)速度和在細(xì)管中的平均流動(dòng)速度。為了保持界面處仍然是穩(wěn)定的流動(dòng),兩管接口處常做的“光滑”一些,如實(shí)線所示。顯然細(xì)管中的V2大于粗管中的V1。當(dāng)接口處的幾何形狀是如虛線的“突變”時(shí),液流進(jìn)入細(xì)管后并不是形成全部平行于細(xì)管壁的穩(wěn)流,而是在細(xì)管入口處有一段“收縮”的區(qū)域,如細(xì)管中的虛線所示。在虛線與管壁之間的流體是靜止不動(dòng)的。只有兩條虛線間的液體是流動(dòng)的,這樣就產(chǎn)生了“自聚焦”現(xiàn)象。顯然。當(dāng)我們把測量區(qū)定在這個(gè)最狹窄處,可提高儀器的CV值,這個(gè)位置不同的噴嘴是不相同的,對噴向空氣中的噴嘴大約在距噴口0.25mm的地方。
為了不同的目的,人們設(shè)計(jì)了各種形狀的噴嘴,如在精子分析中,為滿足流體動(dòng)力學(xué)的要求而作成鴨嘴狀等等。